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凝胶色谱法测定蔗糖铁分子量与分子量分布
一，实验条件
cometro高效液相色谱系统；
示差折光检测器；
Ohpak SB-803 HQ凝胶渗透色谱柱；
GPC软件；
检测器温度45℃；
柱温45℃；
流动相：磷酸缓冲盐（每1000ml含磷酸二氢钠2.76g，磷酸氢二钠2.84g，叠氮化钠0.2g）；
流速：0.5ml/min。
二，实验结果
标准品D4：
其它标准品的谱图类似，略去，附上保留时间与分子量的对应表：
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标准品 |
分子量 |
保留时间/min |
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D1 |
2500 |
18.430 |
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D2 |
4600 |
17.537 |
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D3 |
7100 |
17.193 |
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D4 |
10000 |
16.870 |
|
D5 |
21400 |
16.173 |
|
D6 |
41100 |
15.403 |
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D7 |
84400 |
14.530 |
葡萄糖：
样品：
三，结果讨论
1， 由葡萄糖对照可知标准品中保留时间约为19min的是葡萄糖峰；
2， 由7个标准品的数据，根据保留时间与分子量的关系，建立标准曲线：
3， 由样品谱图结合上面标准曲线得样品分子量与分子量分布结果为：
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SEC Summary information |
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Channel A |
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Processing Start Time(min) = |
12.700 |
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Processing Stop Time(min) = |
17.200 |
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Number of Slices = |
270 |
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Weight Average Molecular Weight = |
68758 |
|
Number Average Molecular Weight = |
45554 |
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Z Average Molecular Weight = |
108087 |
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Z+1 Average Molecular Weight = |
162523 |
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Polydispersity index = |
1.509 |
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Peak Molecular Weight = |
45635 |
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Z Average / Weight Average = |
1.572 |
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Z+1 Average / Weight Average = |
2.364 |
4，由上表看出本品重均分子量（68758）偏大，数均分子量（45554），分布宽度（1.509）合格。
5，综上可以看出该套色谱系统色谱柱对蔗糖铁分子量与分子量分布的检测具有很好的选择性和稳定性。
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